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人成纖維細(xì)胞活化蛋白(FAP)ELISA試劑盒

簡(jiǎn)要描述:人成纖維細(xì)胞活化蛋白(FAP)ELISA試劑盒效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存。公司提供免費(fèi)酶聯(lián)免疫試劑盒(ELISA試劑盒)代測(cè),快速檢測(cè)一周內(nèi)出結(jié)果用于測(cè)定血清、血漿及相關(guān)液體等樣本。

  • 更新日期:2024-11-16
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產(chǎn)品介紹

品牌軒澤康規(guī)格96T,48T
供貨周期現(xiàn)貨主要用途課題研究,科研檢測(cè)
應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥保質(zhì)期6個(gè)月
保存條件2-8℃檢測(cè)方法雙抗體一步夾心法
實(shí)驗(yàn)儀器酶標(biāo)儀樣本類型血清、血清、組織勻漿、細(xì)胞上清液等
靈敏度zui低檢測(cè)濃度小于10 pg/mL特色服務(wù)免費(fèi)代測(cè),支持定制

檢測(cè)前準(zhǔn)備工作:

1. 請(qǐng)?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒,平衡至室溫。

2. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象;放置室溫,輕搖均勻,待結(jié)晶溶解后再配置洗滌液。可將20ml濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋配置成400ml工作濃度的洗滌液,未用完的放回4℃

20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

樣品收集、處理及保存方法:人成纖維細(xì)胞活化蛋白(FAP)ELISA試劑盒

1.  血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2.  血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3.  細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

5.  保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

自備物品:

1. 酶標(biāo)儀(450nm)

2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒溫箱

人成纖維細(xì)胞活化蛋白(FAP)ELISA試劑盒操作步驟:

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

3.  樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加稀釋液40μL;空白孔不加。

4.  除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

ELISA實(shí)驗(yàn)中一般需要4次加樣,即加標(biāo)本、加檢測(cè)抗體、加底物和加終止液。實(shí)驗(yàn)室使用的微量加樣器應(yīng)注意保樣并定期校正。ELISA比較敏感,每孔加入液體量誤差會(huì)導(dǎo)致最后讀書差別,因此避免儀器帶來(lái)誤差。上海軒澤康生物特為您準(zhǔn)備加樣注意事項(xiàng):

1.     加樣前:溶液應(yīng)充分混勻。加樣時(shí)避免90度向孔中滴加液體,否則會(huì)導(dǎo)致液體殘留再吸頭上,從而導(dǎo)致加樣不準(zhǔn)確。正確的加樣方法應(yīng)為45度,吸頭貼著孔壁和液面的交界處加入。

2.     加樣時(shí):避免速度過(guò)快,否則無(wú)法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性;避免液體濺出;

3.     加樣品時(shí):?jiǎn)慰子昧恳螅骸?0微升/指標(biāo),如需要做2個(gè)復(fù)孔則血量≥100微升/指標(biāo)。

4.     每次加樣順序一致,尤其底物、終止液順序一致,保證每個(gè)孔顯色時(shí)間相同。

5.     如果移液槍漏氣以至于加樣的量不夠,不能用槍吸出再加,做相應(yīng)記錄實(shí)驗(yàn)。

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